发酵工程中常用的培养基配方多种多样,具体取决于所要培养的微生物种类及其生长需求。
一、常见培养基配方
1.营养琼脂培养基
用于一般细菌培养。成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和琼脂。将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,校正pH至7.2~7.4,然后加入琼脂,加热煮沸至琼脂溶化,分装烧瓶,进行高压灭菌。
2.营养肉汤培养基
也适用于一般细菌培养。成分与营养琼脂相似,但不加琼脂。各成分混合溶解后,校正pH,分装烧瓶,进行高压灭菌。
3.淀粉琼脂培养基(高氏培养基)
用于霉菌和放线菌的培养。成分包括可溶性淀粉、硝酸钾、磷酸氢二钾、氯化钠、硫酸镁、硫酸亚铁和琼脂。先把淀粉用少量水调成糊状,然后倒入剩余的水中,搅匀后加入其他药品,使其溶解。煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水,调整pH至适宜范围,灭菌后备用。
4.面粉琼脂培养基
适用于某些特定微生物的培养。成分包括面粉和琼脂。用水将面粉调成糊状,加水至一定量后煮沸一段时间。另取一定量的水,放入琼脂,加热煮沸到溶解。将两液调匀,补充水分,调整pH,灭菌后备用。
二、根据微生物需求进行配制
配制培养基时,需考虑微生物的营养需求、pH值、渗透压、特殊生长因子等因素。
1.营养需求
不同微生物对碳源、氮源、无机盐等的需求不同。例如,有些微生物可以利用复杂的有机物质作为碳源和氮源,而有些则需要简单的无机物质。
2.pH值
大多数微生物对pH值有一定的要求。配制培养基时,应使用pH计测量并调整至适宜范围。
3.渗透压
培养基的渗透压对微生物的生长也有影响。过高的渗透压可能导致微生物细胞脱水,而过低的渗透压则可能导致细胞吸水膨胀破裂。
4.特殊生长因子
某些微生物需要特定的生长因子才能生长,如维生素、氨基酸等。在配制培养基时,应根据微生物的需求添加这些特殊生长因子。
三、配制步骤
1.称取数量
使用电子天平准确称取所需各成分。
2.培养基溶化
将称好的成分纳入容器中,加入适量的水,用玻璃棒搅拌使其溶解。如需加热,应使用本生灯或电磁炉,避免直接用火加热。
3.调pH值
使用pH计测量培养基的pH值,并根据需要进行调整。
4.分装与灭菌
将配制好的培养基分装到适当的容器中,如试管、烧瓶等,并进行高压灭菌。
综上所述,发酵工程中常用的培养基配方多种多样,配制时应根据微生物的具体需求进行选择和调整。正确的培养基配制是确保微生物正常生长和发酵成功的关键步骤之一。