生物膜干涉（BLI）是基于光学生物传感的无标记检测技术，核心原理是通过实时监测生物膜厚度变化引发的干涉光谱位移，分析生物分子间的结合与解离过程，精准量化相互作用特性，是分子互作研究中无标记方法的重要代表。
一、分子互作研究方法分类：标记 vs 无标记研究生物分子相互作用的方法可分为两大类，核心差异在于是否需要对分子进行修饰标记：
有标记方法：需通过荧光、同位素、酶等对分子进行标记，常见的有酵母双杂交、Pull Down、免疫共沉淀（Co-IP）、ELISA、FRET、AUC、EMSA、MST 等。这类方法虽应用广泛，但标记过程可能破坏分子天然结构与活性，影响结果真实性。
无标记方法：无需修饰分子，直接检测分子互作引发的物理或能量变化，常见的有表面等离子共振（SPR）、等温滴定量热法（ITC）和生物膜干涉（BLI）。这类方法能最大程度保留分子天然状态，结果更贴近生理实际，其中 BLI 以操作简便、适配复杂样品的优势脱颖而出。
二、BLI 核心原理：从生物膜变化到光谱信号的转化BLI 的检测逻辑围绕 “生物膜厚度变化→光干涉位移→信号分析” 展开，具体过程清晰易懂：
传感器固定分子：将一种目标生物分子（如蛋白、抗原）特异性固定在光纤生物传感器的末端，形成一层均匀的生物膜，这层膜是后续检测的基础。
结合引发厚度变化：当传感器与含有另一种相互作用分子（如配体、抗体）的样品接触时，两种分子会特异性结合，导致传感器末端的生物膜分子量增加，进而引发生物膜厚度的改变。
光干涉产生位移：一束光通过传感器的生物膜层时，会同时发生透射和反射，两束光交汇形成干涉光波。生物膜厚度的微小变化，会直接导致干涉光波的相对位移。
检测与数据分析：光谱仪实时捕捉分子结合前后的干涉光谱，以 “实时位移（nm）” 的形式呈现变化轨迹。通过分析这一轨迹，可还原分子 “结合→解离” 的完整动态过程，进一步计算亲和力（KD）、结合速率（ka）等关键参数。
三、BLI 的核心优势：源于无标记与实时检测的特性BLI 的原理设计决定了其独特优势：
保留分子天然活性：无需标记，避免了修饰过程对分子结构、功能的破坏，能真实反映生理状态下的分子互作。
实时动态监测：全程记录分子结合与解离的每一个阶段，而非仅提供终点结果，可获取更全面的动力学信息。
抗干扰能力强：仅响应传感器表面特异性结合引发的生物膜变化，对样品中的粗制成分、不溶性物质耐受度高，适配复杂样品检测。
总结：无标记检测的 “精准工具”，还原分子互作本貌BLI 通过巧妙利用光干涉现象与生物膜特性，实现了无标记、实时、精准的分子互作分析，弥补了有标记方法可能干扰分子活性的短板。其原理简洁且科学，操作便捷又能保障结果真实性，已成为蛋白相互作用、药物筛选、疫苗研发等领域的核心技术工具。
